介质选择：蔗糖或 Percoll 梯度可提高分辨率。

温度控制：防止酶降解样本。

离心时间：需优化以避免过度压缩沉淀或分离不全。

匀浆细胞，裂解后获得混合细胞器。

首次离心 1000×g 10 分钟，弃沉淀（细胞核）。

上清以 12,000×g 离心 20 分钟，得线粒体沉淀。

再次以 100,000×g 离心 1 小时，获取微粒体膜。

在差速离心过程中，形状对颗粒沉降速度有显着影响。长形颗粒由于其形状不规则，相较于球形颗粒，在离心力作用下的沉降速度会更慢。因此，在进行差速离心时，需要考虑到这一因素，并对实验结果进行校正，以确保得到准确的亚细胞结构分离。

此外，当某些细胞器的密度相近时，仅依靠差速离心可能无法实现有效分离。在这种情况下，需要结合梯度离心等其他技术，以提高分离的准确性和效率。

通过精确控制离心参数，如离心速度、离心时间、离心半径等，以及深入理解颗粒动力学原理，可以更好地利用差速离心技术，高效地分离复杂生物样品中的亚细胞结构。